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尊龙凯时人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒使用指南

来源:别旭杰 日期:2025-03-07

本试剂盒仅供科研用途,禁止用于医学诊断。以下是人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒的使用说明。

尊龙凯时人胚胎羊膜细胞(ALP)Elisa试剂盒使用指南

检测原理

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,依次加入样本、标准品和HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤后,使用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,再在酸性环境中变为最终的黄色。颜色深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关。最后,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1. 血清: 使用无热原和内毒素的试管,操作过程中避免细胞刺激。收集血液后,3000转离心10分钟,迅速分离血清与红细胞。

2. 血浆: 使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转离心30分钟,并取上清。

3. 细胞上清液: 3000转离心10分钟以去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆: 将组织与适量生理盐水混合后捣碎,3000转离心10分钟取上清。

5. 保存: 如样本未能及时检测,建议按一次用量分装,存放于-20℃,避免反复冻融,使用时请在室温下解冻,并确保样品充分混匀。

操作注意事项

试剂盒组成: 注意,标准品(S0-S5)的浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。

试剂准备: 20×洗涤缓冲液需用蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。洗板时请遵循操作步骤。

结果判断

绘制标准曲线:在Excel中以标准品浓度为横坐标,对应OD值为纵坐标,绘制标准品的线性回归曲线,并根据曲线方程计算各样本浓度值。

隐私免责声明:本试剂盒的性能和使用结果可能因多种因素而异,请在使用时谨慎评估。

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